高效液相色谱仪作为精密分析仪器,其性能稳定性和使用寿命高度依赖科学养护。以下从操作规范、组件维护、环境控制及故障处理等方面,系统阐述HPLC的养护要点,帮助用户规避常见问题,延长仪器寿命。
一、日常维护:预防性操作是关键
1. 输液系统维护
- 流动相管理:
① 配置流动相需使用超纯水(电阻率≥18.2 MΩ·cm)或色谱纯溶剂,经0.45 μm滤膜过滤并超声脱气15分钟,避免气泡或颗粒堵塞系统。
② 每日测试前用异丙醇或甲醇冲洗管路,置换残留溶剂,防止盐类析出或微生物滋生。
- 泵保养:
① 运行后及时清洗泵头,禁用腐蚀性溶剂(如浓硫酸)。机械泵需定期检查密封圈,发现渗漏立即更换。
② 避免干吸(泵运转时无液体),可能导致泵头磨损或气穴损伤。
2. 进样系统清洁
- 自动进样器:
① 每次测试后用甲醇-水(50:50)冲洗进样针,并用擦镜纸擦拭针外残留。
② 每周拆卸进样阀,浸泡于10%硝酸溶液中超声清洗,去除缓冲盐结晶。
- 手动进样:
确保样品注入,避免残留污染定量环。高粘度样品需稀释后进样。
3. 色谱柱保护
- 操作规范:
① 严禁直接进样未过滤的样品,建议预装0.22 μm在线过滤器。
② 避免超压运行(通常不超过柱标称压力的80%),突然高压可能导致柱床塌陷。
- 保存方法:
反相柱(C18)需保存于甲醇-水(1:1)中,正相柱(硅胶柱)用正己烷封存,生化柱(如蛋白质柱)需添加防腐剂(如0.05%叠氮钠)。
4. 检测器维护
- 紫外检测器:
① 定期用乙醇擦拭流通池窗口,防止样品残留导致透光率下降。
② 氘灯寿命约2000小时,能量衰减至初始值70%时需更换。
- 荧光检测器:
每次测试后用清水冲洗流通池,避免荧光物质残留干扰后续检测。
二、定期深度维护:保障长期稳定性
1. 系统冲洗与校准
- 季度维护:
① 使用5%硝酸溶液冲洗金属管路,去除氧化沉积物;反相系统可用0.1%磷酸清洗。
② 校准流速精度:通过秒表测量实际流量与设定值偏差应<5%。
- 年度维护:
① 更换老化管路(如PEEK管变脆或变色)。
② 校验检测器波长准确性(使用钬玻璃滤光片校准紫外波长)。
2. 色谱柱再生与评估
- 柱效恢复:
反相柱可用溶液反向冲洗,去除强吸附物质;离子交换柱需用高浓度盐溶液再生。
- 性能评估:
每半年测试柱效(如尿嘧啶峰塔板数≥80%理论值)、保留时间漂移(<15%)及拖尾因子(≤2.0%)。
三、长期停用处理:防止元件损坏
1. 短期停机(<1周):
- 用甲醇冲洗系统后关机,保持色谱柱充满溶剂。
2. 长期停机(>1周):
- 拆卸色谱柱保存,泵头注入硅油防锈,检测器流通池干燥后封口。整机放入防潮箱(湿度<40%)。
四、环境控制与操作规范
1. 温湿度管理:实验室温度需控制在20-25℃,湿度<60%,避免冷凝水腐蚀光学部件。
2. 防尘措施:仪器加盖防尘罩,空气净化系统保持PM10<50 μg/m³。
3. 操作禁忌:严禁带电插拔插头,突然断电前需先关闭主机电源。
五、数据记录与备件管理
1. 维护日志:记录每次维护内容、更换零件批号及仪器状态,便于追溯。
2. 备件储备:常规备用进样阀、密封垫、氘灯、色谱柱(建议同型号备份2根)。